(ஓட்டம் சைட்டோமெட்ரி, எஃப்.சி.எம்) என்பது ஒரு செல் பகுப்பாய்வி, இது கறை படிந்த செல் குறிப்பான்களின் ஒளிரும் தீவிரத்தை அளவிடுகிறது. இது ஒற்றை உயிரணுக்களின் பகுப்பாய்வு மற்றும் வரிசைப்படுத்தலின் அடிப்படையில் உருவாக்கப்பட்ட உயர் தொழில்நுட்ப தொழில்நுட்பமாகும். இது அளவு, உள் அமைப்பு, டி.என்.ஏ, ஆர்.என்.ஏ, புரதங்கள், ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் உயிரணுக்களின் பிற உடல் அல்லது வேதியியல் பண்புகளை விரைவாக அளவிடலாம் மற்றும் வகைப்படுத்தலாம், மேலும் இந்த வகைப்பாடுகளின் சேகரிப்பின் அடிப்படையில் இருக்கலாம்.
ஓட்டம் சைட்டோமீட்டர் முக்கியமாக பின்வரும் ஐந்து பகுதிகளைக் கொண்டுள்ளது:
1 ஓட்ட அறை மற்றும் திரவ அமைப்பு
2 லேசர் ஒளி மூல மற்றும் பீம் வடிவும் அமைப்பு
3 ஆப்டிகல் சிஸ்டம்
4 மின்னணுவியல், சேமிப்பு, காட்சி மற்றும் பகுப்பாய்வு அமைப்பு
5 செல் வரிசையாக்க அமைப்பு
அவற்றில், லேசர் ஒளி மூலத்திலும், பீம் உருவாக்கும் அமைப்பிலும் லேசர் உற்சாகம் என்பது ஓட்டம் சைட்டோமெட்ரியில் ஃப்ளோரசன்ஸ் சிக்னல்களின் முக்கிய அளவீடு ஆகும். உற்சாக ஒளியின் தீவிரம் மற்றும் வெளிப்பாடு நேரம் ஆகியவை ஃப்ளோரசன் சமிக்ஞையின் தீவிரத்துடன் தொடர்புடையவை. லேசர் என்பது ஒரு ஒத்திசைவான ஒளி மூலமாகும், இது ஒற்றை அலைநீளம், உயர்-தீவிரம் மற்றும் உயர் நிலைத்தன்மை வெளிச்சத்தை வழங்க முடியும். இந்த தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்ய இது சிறந்த உற்சாக ஒளி மூலமாகும்.
லேசர் மூலத்திற்கும் ஓட்ட அறைக்கும் இடையில் இரண்டு உருளை லென்ஸ்கள் உள்ளன. இந்த லென்ஸ்கள் லேசர் மூலத்திலிருந்து வெளியேற்றப்படும் வட்ட குறுக்குவெட்டுடன் ஒரு சிறிய குறுக்குவெட்டு (22 μm × 66 μm) கொண்ட நீள்வட்ட கற்றைக்குள் ஒரு லேசர் கற்றை கவனம் செலுத்துகின்றன. இந்த நீள்வட்ட கற்றைக்குள் உள்ள லேசர் ஆற்றல் ஒரு சாதாரண விநியோகத்தின் படி விநியோகிக்கப்படுகிறது, இது லேசர் கண்டறிதல் பகுதி வழியாக செல்லும் கலங்களுக்கு நிலையான வெளிச்சம் தீவிரத்தை உறுதி செய்கிறது. மறுபுறம், ஆப்டிகல் சிஸ்டம் பல செட் லென்ஸ்கள், பின்ஹோல்கள் மற்றும் வடிப்பான்களைக் கொண்டுள்ளது, அவை தோராயமாக இரண்டு குழுக்களாகப் பிரிக்கப்படலாம்: ஓட்ட அறையின் அப்ஸ்ட்ரீம் மற்றும் கீழ்நிலை.
ஓட்ட அறைக்கு முன்னால் உள்ள ஆப்டிகல் சிஸ்டம் ஒரு லென்ஸ் மற்றும் பின்ஹோலைக் கொண்டுள்ளது. லென்ஸ் மற்றும் பின்ஹோலின் முக்கிய செயல்பாடு (பொதுவாக இரண்டு லென்ஸ்கள் மற்றும் ஒரு பின்ஹோல்) லேசர் கற்றை லேசர் மூலத்தால் வெளியேற்றப்படும் வட்ட குறுக்குவெட்டுடன் ஒரு சிறிய குறுக்குவெட்டு கொண்ட நீள்வட்ட கற்றைக்குள் கவனம் செலுத்துவதாகும். இது ஒரு சாதாரண விநியோகத்திற்கு ஏற்ப லேசர் ஆற்றலை விநியோகிக்கிறது, லேசர் கண்டறிதல் பகுதி முழுவதும் உள்ள கலங்களுக்கு நிலையான வெளிச்ச தீவிரத்தை உறுதி செய்கிறது மற்றும் தவறான ஒளியிலிருந்து குறுக்கீட்டைக் குறைக்கிறது.
வடிப்பான்களில் மூன்று முக்கிய வகை உள்ளன:
1: லாங் பாஸ் வடிகட்டி (எல்பிஎஃப்) - ஒரு குறிப்பிட்ட மதிப்பை விட அதிகமான அலைநீளங்களைக் கொண்ட ஒளியை மட்டுமே கடந்து செல்ல அனுமதிக்கிறது.
2: குறுகிய -பாஸ் வடிகட்டி (SPF) - ஒரு குறிப்பிட்ட மதிப்புக்குக் கீழே அலைநீளங்களைக் கொண்ட ஒளியை மட்டுமே கடந்து செல்ல அனுமதிக்கிறது.
3: பேண்ட்பாஸ் வடிகட்டி (பிபிஎஃப்) - ஒரு குறிப்பிட்ட அலைநீள வரம்பில் ஒளியை மட்டுமே கடந்து செல்ல அனுமதிக்கிறது.
வடிப்பான்களின் வெவ்வேறு சேர்க்கைகள் வெவ்வேறு அலைநீளங்களில் ஃப்ளோரசன்ஸ் சிக்னல்களை தனிப்பட்ட ஒளிமின்னழுத்த குழாய்களுக்கு (பிஎம்டிக்கள்) இயக்க முடியும். எடுத்துக்காட்டாக, PMT க்கு முன்னால் பச்சை ஃப்ளோரசன் (FITC) ஐக் கண்டறிவதற்கான வடிப்பான்கள் LPF550 மற்றும் BPF525 ஆகும். PMT க்கு முன்னால் ஆரஞ்சு-சிவப்பு ஃப்ளோரசன் (PE) ஐக் கண்டறியப் பயன்படுத்தப்படும் வடிப்பான்கள் LPF600 மற்றும் BPF575 ஆகும். PMT க்கு முன்னால் சிவப்பு ஃப்ளோரசன் (CY5) ஐக் கண்டறிவதற்கான வடிப்பான்கள் LPF650 மற்றும் BPF675 ஆகும்.
ஓட்டம் சைட்டோமெட்ரி முக்கியமாக செல் வரிசையாக்கத்திற்கு பயன்படுத்தப்படுகிறது. கணினி தொழில்நுட்பத்தின் முன்னேற்றம், நோயெதிர்ப்பு வளர்ச்சியின் வளர்ச்சி மற்றும் மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடி தொழில்நுட்பத்தின் கண்டுபிடிப்பு, உயிரியல், மருத்துவம், மருந்தகம் மற்றும் பிற துறைகளில் அதன் பயன்பாடுகள் பெருகிய முறையில் பரவலாகி வருகின்றன. இந்த பயன்பாடுகளில் செல் இயக்கவியல் பகுப்பாய்வு, செல் அப்போப்டொசிஸ், செல் தட்டச்சு, கட்டி நோயறிதல், மருந்து செயல்திறன் பகுப்பாய்வு போன்றவை அடங்கும்.
இடுகை நேரம்: செப்டம்பர் -21-2023
