(ஃப்ளோ சைட்டோமெட்ரி , FCM ) என்பது செல் பகுப்பாய்வி ஆகும், இது படிந்த செல் குறிப்பான்களின் ஒளிரும் தீவிரத்தை அளவிடுகிறது. இது ஒற்றை செல்களின் பகுப்பாய்வு மற்றும் வரிசைப்படுத்தலின் அடிப்படையில் உருவாக்கப்பட்ட உயர் தொழில்நுட்ப தொழில்நுட்பமாகும். இது உயிரணுக்களின் அளவு, உள் அமைப்பு, டிஎன்ஏ, ஆர்என்ஏ, புரதங்கள், ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் பிற இயற்பியல் அல்லது வேதியியல் பண்புகளை விரைவாக அளவிடலாம் மற்றும் வகைப்படுத்தலாம், மேலும் இந்த வகைப்பாடுகளின் தொகுப்பின் அடிப்படையில் இருக்கலாம்.
ஃப்ளோ சைட்டோமீட்டர் முக்கியமாக பின்வரும் ஐந்து பகுதிகளைக் கொண்டுள்ளது:
1 ஓட்ட அறை மற்றும் திரவ அமைப்பு
2 லேசர் ஒளி மூல மற்றும் பீம் வடிவ அமைப்பு
3 ஆப்டிகல் சிஸ்டம்
4 மின்னணுவியல், சேமிப்பு, காட்சி மற்றும் பகுப்பாய்வு அமைப்பு
5 செல் வரிசையாக்க அமைப்பு
அவற்றில், லேசர் ஒளி மூலத்தில் லேசர் தூண்டுதல் மற்றும் பீம் உருவாக்கும் அமைப்பானது ஓட்டம் சைட்டோமெட்ரியில் ஃப்ளோரசன் சிக்னல்களின் முக்கிய அளவீடு ஆகும். தூண்டுதல் ஒளியின் தீவிரம் மற்றும் வெளிப்பாடு நேரம் ஆகியவை ஒளிரும் சமிக்ஞையின் தீவிரத்துடன் தொடர்புடையவை. லேசர் ஒரு ஒத்திசைவான ஒளி மூலமாகும். இந்தத் தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்ய இது சிறந்த தூண்டுதல் ஒளி மூலமாகும்.
லேசர் மூலத்திற்கும் ஓட்ட அறைக்கும் இடையில் இரண்டு உருளை லென்ஸ்கள் உள்ளன. இந்த லென்ஸ்கள் லேசர் மூலத்திலிருந்து உமிழப்படும் வட்ட குறுக்குவெட்டுடன் கூடிய லேசர் கற்றையை ஒரு சிறிய குறுக்குவெட்டுடன் (22 μm × 66 μm) நீள்வட்ட கற்றைக்குள் செலுத்துகிறது. இந்த நீள்வட்ட கற்றைக்குள் உள்ள லேசர் ஆற்றல் ஒரு சாதாரண விநியோகத்தின் படி விநியோகிக்கப்படுகிறது, இது லேசர் கண்டறிதல் பகுதி வழியாக செல்லும் செல்களுக்கு நிலையான வெளிச்சத்தின் தீவிரத்தை உறுதி செய்கிறது. மறுபுறம், ஆப்டிகல் சிஸ்டம் லென்ஸ்கள், பின்ஹோல்கள் மற்றும் வடிப்பான்களின் பல தொகுப்புகளைக் கொண்டுள்ளது, அவை தோராயமாக இரண்டு குழுக்களாகப் பிரிக்கப்படலாம்: ஓட்ட அறையின் மேல்நிலை மற்றும் கீழ்நிலை.
ஓட்ட அறைக்கு முன்னால் உள்ள ஒளியியல் அமைப்பு ஒரு லென்ஸ் மற்றும் பின்ஹோல் ஆகியவற்றைக் கொண்டுள்ளது. லென்ஸ் மற்றும் பின்ஹோலின் முக்கிய செயல்பாடு (பொதுவாக இரண்டு லென்ஸ்கள் மற்றும் ஒரு பின்ஹோல்) லேசர் மூலத்தால் உமிழப்படும் வட்ட குறுக்குவெட்டுடன் லேசர் கற்றை ஒரு சிறிய குறுக்குவெட்டு கொண்ட நீள்வட்ட கற்றைக்கு கவனம் செலுத்துவதாகும். இது லேசர் ஆற்றலை ஒரு சாதாரண விநியோகத்தின்படி விநியோகிக்கிறது, லேசர் கண்டறிதல் பகுதி முழுவதும் உள்ள செல்களுக்கு சீரான வெளிச்சத்தின் தீவிரத்தை உறுதி செய்கிறது மற்றும் தவறான ஒளியிலிருந்து குறுக்கீட்டைக் குறைக்கிறது.
வடிப்பான்களில் மூன்று முக்கிய வகைகள் உள்ளன:
1: லாங் பாஸ் ஃபில்டர் (எல்பிஎஃப்) - குறிப்பிட்ட மதிப்பை விட அதிக அலைநீளங்களைக் கொண்ட ஒளியை மட்டுமே கடந்து செல்ல அனுமதிக்கிறது.
2: ஷார்ட்-பாஸ் ஃபில்டர் (SPF) - ஒரு குறிப்பிட்ட மதிப்பிற்குக் கீழே அலைநீளங்களைக் கொண்ட ஒளியை மட்டுமே கடந்து செல்ல அனுமதிக்கிறது.
3: பேண்ட்பாஸ் வடிகட்டி (பிபிஎஃப்) - குறிப்பிட்ட அலைநீள வரம்பில் உள்ள ஒளியை மட்டுமே கடந்து செல்ல அனுமதிக்கிறது.
வடிப்பான்களின் வெவ்வேறு சேர்க்கைகள் வெவ்வேறு அலைநீளங்களில் ஃப்ளோரசன் சிக்னல்களை தனிப்பட்ட ஃபோட்டோமல்டிபிளையர் குழாய்களுக்கு (பிஎம்டிகள்) அனுப்பலாம். எடுத்துக்காட்டாக, PMTக்கு முன்னால் பச்சை ஒளிரும் தன்மையைக் (FITC) கண்டறிவதற்கான வடிப்பான்கள் LPF550 மற்றும் BPF525 ஆகும். PMTக்கு முன்னால் உள்ள ஆரஞ்சு-சிவப்பு ஒளிர்வை (PE) கண்டறியப் பயன்படும் வடிப்பான்கள் LPF600 மற்றும் BPF575 ஆகும். PMTக்கு முன்னால் சிவப்பு ஒளிர்வை (CY5) கண்டறிவதற்கான வடிகட்டிகள் LPF650 மற்றும் BPF675 ஆகும்.
ஃப்ளோ சைட்டோமெட்ரி முக்கியமாக செல் வரிசைப்படுத்துவதற்குப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. கணினி தொழில்நுட்பத்தின் முன்னேற்றம், நோயெதிர்ப்பு வளர்ச்சி மற்றும் மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடி தொழில்நுட்பத்தின் கண்டுபிடிப்பு, உயிரியல், மருத்துவம், மருந்தகம் மற்றும் பிற துறைகளில் அதன் பயன்பாடுகள் பெருகிய முறையில் பரவலாகி வருகின்றன. இந்த பயன்பாடுகளில் செல் இயக்கவியல் பகுப்பாய்வு, செல் அப்போப்டொசிஸ், செல் தட்டச்சு, கட்டி கண்டறிதல், மருந்து செயல்திறன் பகுப்பாய்வு போன்றவை அடங்கும்.
இடுகை நேரம்: செப்-21-2023
